Desenvolvimento de metodologia baseada em HPLC/MS/MS para a determinação de 3-O-metildopa em plasma humano e sua aplicação a estudos de bioequivalência

Heliana Figueiredo Martins; Douglas Pereira Pinto; Viviane de Assis Nascimento; Marlice Aparecida Sipoli Marques; Fábio Coelho Amendoeira

doi:10.18241/0073-98552014731593

Heliana Figueiredo Martins Fundação Oswaldo Cruz, Laboratório de Farmacocinética, Rio de Janeiro, RJ
Douglas Pereira Pinto Fundação Oswaldo Cruz, Laboratório de Farmacocinética, Rio de Janeiro, RJ
Viviane de Assis Nascimento Fundação Oswaldo Cruz, Laboratório de Farmacocinética, Rio de Janeiro, RJ
Marlice Aparecida Sipoli Marques Universidade Federal do Rio de Janeiro, Instituto de Química, Departamento de Química Analítica, Rio de Janeiro, RJ
Fábio Coelho Amendoeira Fundação Oswaldo Cruz, Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde, Departamento de Fisiologia e Farmacodinâmica, Laboratório de Farmacologia, Rio de Janeiro, RJ

DOI: https://doi.org/10.18241/0073-98552014731593

Palavras-chave: 3-O-methyldopa, HPLC-ESI-MS/MS, bioequivalence, plasma, pharmacokinetics.

Resumo

Uma metodologia específica simples e sensível baseado em HPLC/MS/MS foi desenvolvida e validada para realizar a determinação de 3-o-metildopa, o principal metabolito da dopamina, em plasma humano. A separação foi realizada em coluna analítica Atlantis T3 C18 (5 μm; 150 x 4,6 mm i.d.), utilizando-se uma fase móvel composta por uma solução de agua e metanol (85:15, v/v), e contendo 0,05 % de acido fórmico. A extração do analito e da amostra padrão interno foi executada utilizando-se uma simples precipitação proteica no plasma com acido perclórico. A detecção foi realizada por meio de espectrômetro de massa triplo quadrupolo, em modo de monitoramento de reações múltiplas (MRM) positivo. A transição monitorizada foi m/z 212,0  m/z 166,0 para 3-O-metildopa e m/z 227,1  m/z 181,0 para carbidopa (padrao interno). As curvas de calibração foram lineares na faixa de 50 a 4000 ng/mL para 3-O-metildopa. A metodologia apresentou boa precisão e exatidão de acordo com os critérios para analises biomédicas e esta foi aplicada com sucesso no estudo de bioequivalência de duas formulações contendo levodopa +benserazida (200 + 50 mg) em amostras de plasmas humanos.