Eletroforese em campo pulsante em bacteriologia - uma revisão técnica

Vanda D. Magalhães; Joseane C. Ferreira; Cristiane Barelli; Ana Lúcia C. Darini

Vanda D. Magalhães Instituto de Ensino e Pesquisa Albert Einstein, Centro de Pesquisa Experimental, São Paulo, SP
Joseane C. Ferreira Universidade de São Paulo, Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto, Departamento de Análises Clínicas, Toxicológicas e Bromatológicas, Laboratório de Bacteriologia e Epidemiologia Molecular, Ribeirão Preto, SP
Cristiane Barelli Universidade de Passo Fundo, Instituto de Ciências Biológicas, Curso de Farmácia, Passo Fundo, RS
Ana Lúcia C. Darini Universidade de São Paulo, Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto, Departamento de Análises Clínicas, Toxicológicas e Bromatológicas, Laboratório de Bacteriologia e Epidemiologia Molecular, Ribeirão Preto, SP

Palavras-chave: epidemiologia molecular, métodos moleculares, genotipagem bacteriana, PFGE

Resumo

PFGE ("pulsed field gel eletrophoresis") é a sigla usada para indicar qualquer técnica de eletroforese apropriada para separar grandes fragmentos de DNA, por meio da reorientação do DNA em gel pela ação de campos elétricos alternados. Esta técnica é reconhecida como padrão ouro para identificação de linhagens bacterianas, fúngicas e de protozoários. O principal objetivo deste estudo de revisão é o da elucidação dos fundamentos da técnica de PFGE ou eletroforese de campo pulsante aplicada em estudo com bactéria. Sua resolução depende de uma série de fatores como: voltagem, concentração de agarose, temperatura, solução tamponante, tempo de pulso e de corrida eletroforética. A compreensão dos mecanismos moleculares envolvidos nesse tipo de eletroforese é fundamental para a otimização e obtenção dos resultados apropriados.